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          細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量檢測試劑盒
          時(shí)間:2023/2/22 點(diǎn)擊次數:1804

          細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)(中文版) 主要用途 細細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量檢測試劑盒是一種旨在通過(guò)含硫多肽底物以及特定抑 制劑存在與否的情況下,受到 MMP2 的水解,釋放出巰基,進(jìn)而使用 Ellman 試劑,產(chǎn)生黃色 5-巰基-2-基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來(lái)測定細胞裂解樣品中酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該 技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)、部分或純化 酶樣品中基質(zhì)金屬蛋白酶 2 的特異活性定量檢測,以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴格無(wú)菌,即到即用, 操作簡(jiǎn)捷,性能穩定,安全可靠。 技術(shù)背景 細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量檢測試劑是一類(lèi)結構高度同源的分泌型或膜相關(guān)性鋅內肽 酶的總稱(chēng),因含有金屬(鋅、鈣)離子而得名。其功能在于分解細胞外基質(zhì)成分。迄今為止發(fā)現的MMPs 至少有28種,幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質(zhì)(extracellular matrix)成分,同時(shí)參與胚胎發(fā)育、 形態(tài)形成、胚泡植入(blastocyst)、血管形成、組織再吸收(tissue resorption)、疾病發(fā)生,例如關(guān)節炎、癌 細胞浸入轉移等。根據降解的底物不同可將MMPs分為4大類(lèi):(1)膠原酶:MMP1、MMP8、MMP13主要 消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖;(2)明膠酶(Ⅳ型膠原酶):MMP2、MMP9,又稱(chēng)明膠酶A、 B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維;(3)基質(zhì)溶解素:MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、 MMP12,主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、 MMP9;(4)膜型金屬蛋白酶:MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP,主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。 體內絕大多數細胞并不儲備MMPs,當需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時(shí)合成,合成的MMPs以無(wú)活性 的酶原(proenzyme)形式分泌到細胞外,隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活,一種激活的 MMPs可激活另一種MMPs,形成瀑布效應?;|(zhì)金屬蛋白酶-2,又稱(chēng)明膠酶A gelatinase-A)或IV型膠原 酶(type IV collagenase),其前體分子量為72kDa,激活后分子量為6256 kDa。它在血清或細胞上清中濃 度通常為10200納克/毫升。它的作用目標是天然和變性膠原蛋白(collagens)、纖維連接蛋白(fibronectin)、 彈性纖維蛋白(elastin)、層粘連蛋白-5 laminin-5)、前體腫瘤壞死因子-α(pro-TNF-α)和神經(jīng)(蛋 白)聚糖(neurocan)?;|(zhì)金屬蛋白酶-2與腫瘤發(fā)展與轉移、血管形成、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)?;?含硫多肽(thiopeptide)底物Ac-PLG2-mercapto-4-methyl-pentanoyl-LG-OC2H5,在特異性抑制劑OA-Hy 存在與否的條件下,受到MMP2的水解,釋放出巰基(sulfhydryl group),進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸 5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過(guò)其吸收峰值的變化(412nm波長(cháng)),來(lái)定量測定細胞基質(zhì)金屬蛋 白酶2的特異活性?;|(zhì)金屬蛋白酶2反應系統為: 產(chǎn)品內容 清理液(Reagent A毫升 裂解液(Reagent B毫升 緩沖液(Reagent C毫升 反應液(Reagent D毫升

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